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酶标分析仪检定规程是怎样的?

作者:admin    时间:2021-06-01 01:16:54    点击次数:1229
         酶标分析仪在实验室中的应用越来越普及,酶标分析仪的验证也越来越重要。酶标分析仪的检定内容主要包括干扰滤波器波长误差和重复性、吸光度误差、稳定性和重复性、仪器灵敏度、通道差和吸光度线性。下面山东莱恩德智能科技小编就这几项在实验测定时的要求给大家介绍下:

一、吸光度示值稳定性(r)的检定:

  选用492nm波长或仪器特有的专一波长,将吸光度标称值为1.0A的光谱中性滤光片,平放在微孔酶标板的空板架上,以空气为参比,测量并记录酶标仪的初始吸光度示值(A0),5min、10min后分别再测一次。吸光度示值稳定性(r)计算:r等于后两次吸光度示值的Zda值与A0的差。

二、波长示值误差和波长重复性的检定:

  从酶标仪取出仪器所用有标称波长(λ)的干涉滤光片(405,450,492,620nm),使用波长示值误差优于±0.5nm的分光光度计,将干涉滤光片用1mm左右铜或铝金属丝悬挂固定于分光光度计比色杯架第二孔右外侧,干涉滤光片平面需与入射光束垂直。以1nm的改变幅度,从低到高,检测各干涉滤光片在(±20)nm范围内的透射比,绘制波长一透射比特性曲线,求出峰值波长(λi),每片干涉滤光片重复检测三次并求峰值波长均值。

  干涉滤光片波长示值误差(△λ)计算:△λ=峰值波长均值-λ;波长重复性(δλ)计算:δλ等于三次检测峰值波长Zda值和Z小值之差。

三、吸光度示值误差的检定:

  先将吸光度标称值(A)分别为0.2,0.5,1.0,1.5的四块光谱中性滤光片(分光光度计附件),在分光光度计上依次选用405,450,492,630nm波长或酶标仪特有的专一波长,以空气为参比,检测光谱中性滤光片的吸光度。每个滤光片每个波长检测三次,取均值作为该片在该波长下的吸光度标准值(As)。然后,将四块光谱中性滤光片同时平放在微孔酶标板的空板架上,以空气为参比,酶标仪连续测量3次,依次记录仪器吸光度示值,并计算平均值(Ax)。

  吸光度示值误差(△A)计算:△A=Ax-As,取计算后的所有△A中的误差Zda值作为该酶标仪的吸光度示值误差。

四、吸光度重复性的检定:

  按吸光度示值计算的方法将吸光度标称值(A)为0.5或1.0光谱中性滤光片,以空气为参比,于酶标检测仪微孔酶标板的空板架某一固定孔位重复测定6次(n),记录每一次吸光度(Xi),求吸光度均值,按下式计算RSD偏差值(RSD),以RSD表示仪器吸光度重复性。

五、灵敏度检定:

  选用450nm波长或仪器特有的专一波长,使用量程适合并检定合格的A级加样器,在未包被的空板条某一孔加入200μl含铬量为5mg/L的重铬酸钾溶液,测量并记录吸光度值(Am),此吸光度值即为酶标仪灵敏度。

六、通道差异检定:

  多通道酶标仪选用450nm波长或仪器特有的某一波长,将吸光度标称值为1.0A光谱中性滤光片置于空板架上,以空气为参比,依次检测该滤光片在各通道的吸光度。通道差异(δA)计算:δA等于所有通道检测吸光度中Zda值和Z小值的差。

七、线性验证:

  将含铬量为700mg/L的重铬酸钾溶液和0.05mol/L的硫酸溶液按比例(0:7,1:6,2:5,3:4,4:3,5:2,6:1,7:0)配成不同稀释度的系列溶液共8管,每管取200μl加入未包被的空板条微孔,以450nm/630nm双波长检测吸光度,重复测定两次取均值,进行回归分析,计算相对标准估计误差(Sy,x)。

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