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酶标仪与分光光度计有什么区别,它们的优缺点又是什么?

时间:2021-12-23 10:52:02 点击次数:2020
 

    酶标仪和分光光度计是实验室常用的分析和测量工具。它们的判定原则是一样的。他们都用朗伯比尔定律来测定样品的吸光度。那么它们之间有什么区别呢?让我为你解释一下它们的不同之处!

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    一、酶标仪和分光光度计的三大差别


    酶标仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。


    分光光度计,又称光谱,是将成分复杂的光分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。


    同为,实验室内测定吸光度的仪器,酶标仪和分光光度计存在一些不同之处,具体差别体现在以下三个方面:


    (1)盛装待测溶液的容器:


    分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。


    (2)光路的方向:


    分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。


    (3)光路的长度:


    由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。


    分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。


    而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。


    二、酶标仪和分光光度计的优缺点比较


    分光光度计:


    优点:1、检测波长范围较宽;2、加样量不一致对测量结果没有影响。


    缺点:1、工作量大,操作繁琐,耗时;2、耗试剂;3、结果稳定性差,重复性较差,误差较大;4、对于微量物质,难以检测到。


    主要应用领域:药品检验、药物分析、环境检测、卫生防疫食品、化工、科研等领域对物质进行定性、定量分析。


    酶标仪:


    优点:1、一次性处理样品量大,省时;2、样本、试剂用量少;3、操作简单,重复性好,检测速度快、效率高。


    缺点:1、酶标仪96孔板在紫外光区有较强的紫外吸收,应尽量避免在300nm以下使用酶标仪进行含量测定;2、必须确保微孔板每个孔加样量严格一致,对实验者的操作技能提出了更高的要求。


    主要应用领域:临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学等。


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