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酶标仪检测黄曲霉毒素的正确方法

时间:2021-04-01 09:21:39 点击次数:63
 

黄曲霉毒素B1是自然界中最强的致癌物之一。它普遍存在于玉米、花生、巴西坚果和棉籽中。由于霉菌毒素的毒性,欧洲对黄曲霉毒素B1的限量为2ppb,对总黄曲霉毒素的限量为4ppb。

该酶标仪可快速、准确地检测谷物、饲料等食品中的黄曲霉毒素B1,下面小编就如何使用酶标仪检测黄曲霉毒素的正确方法做如下讲解。

一、检测原理

黄曲霉毒素B1检测试剂盒是基于直接竞争酶联免疫吸附法的原理。

(1)样品提取物或黄曲霉B1标准品100ul,酶联共轭物200ul,混合后取100ul。

(2)加入抗体包覆的微孔中,等待15分钟。

(3)洗板去除不参与抗原抗体反应的黄曲霉毒素B1,

(4)将酶底物100ul加入微孔中,等待5分钟,颜色变蓝,颜色与黄曲霉毒素B1含量成反比,

(5)加入100ul的终端液,颜色变黄。

二、测试步骤

1. 取5ml固体或液体样品,加入70%甲醇25ml,混合3分钟,休息10分钟,过滤,收集滤液,吸滤液100ul,加入分析缓冲液100ul,混合。

2. 取出涂有抗体的绿色稀释孔和无色稀释孔,分别放在平板架上。

3.将酶偶联物200ul加入绿色稀释孔中,然后分别从标准样(0,2,5,20,50ppb)和步骤1待测混合样品中分别吸收100ul,混匀3次。

4. 将100ul的混合液加入无色抗体包被稀释孔中静置15分钟。

5. 将液体倒入小孔中,用蒸馏水冲洗每个小孔。将微孔倒挂在纸巾上,沥干水分。

6. 加入100ul基材静置5分钟,直至颜色变蓝。

7. 加入100ul的终端液,颜色会变黄。

8. 机器测试(酶标滤镜450nm,微分滤镜630nm)

9. 稀释因子f

10. 定量限:原料奶0.002ug/kg,

11. 牛奶或花生酱≤20ug/kg,合格,

12. 计算公式:X= c*f

注意:

1. Assay Buffer Assay Buffer Assay Buffer Assay Buffer Assay溶液

2. 使用前应将套件还原至室温(18~30度)。使用后应置于2~8度冰箱内保存

3.标准样品含有毒素和致癌性。使用时应戴橡胶手套、安全眼镜、工作服等防护装备

4. 在读数前,微孔中不能有气泡,否则会影响分析结果

5. 标准曲线相关系数r≥0.9850

6. 请严格遵守指定的操作时间,否则数据将无法读取

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