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酶标检测仪单波长与多波长应用解析原理

时间:2021-06-15 01:18:09 点击次数:53
          酶标检测仪的波长应用解析原理。当酶标检测仪采用单波长测量吸光度时,除了测量过程中的内源干扰(包括噪声、漂移、电压等)外,液体的表面张力也会对其产生较大的影响。在检测过程中,由于液体表面的表面张力,液体表面不是平坦的表面,而是凹面,从侧面看像凹透镜,必然会影响光路的正常通过。由于液体表面的凹面的影响,当光线通过液体表面时,除了一部分通常被液体吸收外,还有一部分被折射和反射(如光线通过凹透镜),这就影响了吸光度的检测。微孔板阅读器使用点光源,通过光纤。如果每次都能在同一位置检测到,就保证了吸光度的重复性。然而,由于机械运动引起的误差,不可能保证每个孔都在相同的位置。部分被检测到,所以孔与孔之间有一定的区别。
      酶标检测仪的波长应用解析,在双波长测量中,减少了测量干扰和电路干扰,使测量结果显著提高。由于液体表面张力的差异,单波长测量的误差比较大。另外,使用不同的洗涤剂会影响最后一次添加后的底物和终止液的水平。用添加了表面活性剂的洗涤剂清洗后,产生的液位会更凹,这对单波长检测有更大的影响。它与表面活性剂的浓度成正比。用中性蒸馏水洗涤后,单波长和双波长检测技术的结果基本相同。
      酶标检测仪在酶联免疫法测定抗原、抗体中,常用标记酶辣根过氧化物酶所使用的底物一般是邻苯二胺或四甲基联苯胺,显色终止后,二者在6 3 0nm 和6 5 5nm处的吸光度值都只在吸收峰处 (4 9 2 n m/4 5 0 nm )吸光度值的 1 %以下,因此,利用双波长检测,不会影响检测的灵敏度。建议在进行酶联免疫检测时, 酶标仪比色应该首先双波长。这样可以提高临界值处标本的分析准度, 减少实验误差。

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